Western blot
Dlaczego to jest na topie
Interest in “Western blot” spiked on Wikipedia on 2026-02-25.
Categorised under Historia, this article fits a familiar pattern. Historical topics gain renewed attention when tied to commemorations, documentaries, or current events that echo past episodes.
By monitoring millions of daily Wikipedia page views, GlyphSignal helps you spot cultural moments as they happen and understand the stories behind the numbers.
Kluczowe wnioski
- Western blot , western blotting , immunoblotting – metoda stosowana w biologii molekularnej służąca do wykrywania określonych białek.
- Procedura Przygotowanie próbek Badane białka muszą zostać uwolnione z komórek przy użyciu technik rozbijania tkanek lub dezintegracji komórek, a następnie oczyszczania białek.
- Następnie określa się stężenie białek w próbkach, aby użyć odpowiednich ilości w elektroforezie.
- Zdenaturowane białka w wyniku tego procesu zostają rozdzielone według ich mas cząsteczkowych.
- Rzadziej stosuje się elektroforezę w niedenaturujących warunkach, bez SDS.
Western blot, western blotting, immunoblotting – metoda stosowana w biologii molekularnej służąca do wykrywania określonych białek. Technika ta obejmuje przygotowanie próbek z mieszaniną białek, elektroforezę, przeniesienie rozdzielonych białek z żelu na membranę, inkubację z odpowiednimi przeciwciałami i detekcję pożądanego białka.
Procedura
Przygotowanie próbek
Badane białka muszą zostać uwolnione z komórek przy użyciu technik rozbijania tkanek lub dezintegracji komórek, a następnie oczyszczania białek. Dla lepszego rozpuszczenia białek dodaje się czynniki chaotropowe, redukujące, detergenty, bufory, sole. Następnie określa się stężenie białek w próbkach, aby użyć odpowiednich ilości w elektroforezie.
Elektroforeza
Próbki poddaje się elektroforezie w żelu poliakryloamidowym w obecności SDS (SDS-PAGE). Zdenaturowane białka w wyniku tego procesu zostają rozdzielone według ich mas cząsteczkowych. Mają one postać serii prążków na żelu, które można zwizualizować przez barwienie błękitem Coomassie lub srebrem.
Rzadziej stosuje się elektroforezę w niedenaturujących warunkach, bez SDS. Na rozdział taki ma wpływ wtedy również natywny ładunek białka, ponadto interakcje między białkami, więc skutek takiego rozdziału jest nieprzewidywalny (na przykład jedne białka mogą migrować w stronę jednej elektrody, inne w stronę drugiej).
Content sourced from Wikipedia under CC BY-SA 4.0
